A однократное центрифугирование с низкой g-силой стадия обеспечивает легкий лизис клеток и предотвращает обширный контакт ядер с цитоплазматической средой. Этот быстрый метод показывает высокую воспроизводимость из-за относительно небольшого количества манипуляций с клетками, требуемых исследователем.
Что центрифугирование делает с клетками?
Центрифугирование на разных скоростях позволяет разделить частицы на «фракции» в зависимости от того, насколько легко они осаждаются (вставка 1). Например, при низких скоростях центрифугирования можно отделить крупные клетки от мелких.
Удаляет ли центрифугирование мертвые клетки?
Разделение мертвых и живых клеток центрифугированием
Одним из самых простых методов удаления клеточного дебриса является центрифугирование в градиенте плотности. Центрифугирование в градиенте плотности использует устройство, называемое центрифугой, которое вращает гетерогенную смесь на высоких скоростях.
Как вы лизируете клетки?
Техника включает замораживание клеточной суспензии в ванне с сухим льдом/этанолом или в морозильной камере, а затем оттаивание материала при комнатной температуре или 37°C. Этот метод лизиса заставляет клетки набухать и в конечном итоге разрушаться, поскольку кристаллы льда образуются в процессе замораживания, а затем сжимаются во время оттаивания.
Что происходит, если центрифугировать клетки слишком быстро?
Слишком быстрое вращение может вызвать «размазывание» клеток по стенке пробирки, которое вы можете пропустить при ресуспендировании клеток.
