Бимолекулярная флуоресцентная комплементация (BiFC) – это метод, используемый для непосредственной визуализации взаимодействия белок-белок in vivo с использованием визуализации живых клеток или фиксированных клеток. … BiFC был впервые описан Hu et al.
Как работает бимолекулярная флуоресцентная комплементация?
Принцип работы BiFC основан на развитии флуоресцентного комплекса, в результате объединения двух сегментов флуоресцентного белка при их близком расположении за счет белок-белкового взаимодействия во фрагментах, т.е., в BiFC флуорофор делится на амино- и карбоксильный концевые концы.
Что такое тест BiFC?
анализ бимолекулярной флуоресценции комплементации (BiFC) обеспечивает простую и прямую визуализацию белковых взаимодействий в живых клетках (45). Подход BiFC основан на образовании флуоресцентного комплекса, когда два белка, слитые с нефлуоресцентными фрагментами флуоресцентного белка, взаимодействуют друг с другом (рис.).
Для чего проводится тест BiFC?
Идея BiFC состоит в том, чтобы экспрессировать половинки GFP, слитые с интересующими вас белками Если POI взаимодействуют, вы можете объединить обе половинки, чтобы получить функциональный GFP. Так что, если в клетке экспрессируется половина GFP, меня не удивляет, что GFP-антитела могут ее обнаружить.
Обратим ли BiFC?
Необратимость комплексов BiFC хорошо задокументирована (10), и может показаться, что большинство, если не все, системы BiFC на основе флуоресцентных белков являются необратимыми (8, 33, 43, 48–51).
